Imobilização Covalente na Superfície de Sílica Gel da Enzima β-1,3-Glucanase Produzida por Trichoderma Harzianum

  • Fernando A. Silva Universidade Federal de Goiás (UFG), Goiânia / Faculdade Senai Roberto Mange, Anápolis
  • Edésio F. C. Alcântara Universidade Federal de Goiás (UFG), Goiânia
  • Valdirene N. Monteiro Universidade Federal de Goiás (UFG), Goiânia
Palavras-chave: β-1,3-glucanase. Imobilização. Sílica gel.

Resumo

Neste trabalho, o suporte utilizado para imobilizar a enzima β-1,3-glucanase foi a sílica gel (ΞSi-OH) com área superfi cial (SBET) de 466,0 m2 .g-1, volume (V) e diâmetro médio de poros (Ď) de 0,803 cm3 .g-1 e 6,89 nm, respectivamente. A sílica foi modifi cada via reação de silanização com os grupos 3-aminopropiltrimetoxisilano (ΞSi-NH2 ), seguida de funcionalização com glutaraldeído (G) (2,5% v/v) (ΞSi-NH-G). A enzima β-1,3- glucanase (extrato bruto) produzida por Trichoderma harzianum, na concentração de 0,069 mg.cm-3 de proteína total, foi imobilizada covalentemente ao suporte funcionalizado com glutaraldeído (ΞSi-NH-G-Enzima), obtendo-se 0,512 mg de proteína imobilizada por grama de ΞSi-NH-G. Os ensaios enzimáticos de atividades específi cas forneceram 2,30 U.mg-1 para a enzima imobilizada e de 1,88 U.mg-1 para a enzima livre.

Referências

1. Bailey, J.E. &Ollis, D.F. Biochemical eng. Fundanmentals. 2nd. New York, McGraw-Hill, 1986.

2. Fernandes, K.F., Lima,C.S., Lopes, F.M. Técnicas de Imobilização de Enzimas. Revista Processos Químicos, 2010.

3. Hartemeier, W. Immobilized Biocatysts – na Introdution, Trans. J. Wieser, Berlin, Springer-Verlag, 1988.

4. Kirk, O., Borchert, T.V. & Fuglsang, C.C. Industrial enzyme application. Current opinion in biotechonology, vol.13 n0 4, 345-351, 2002.

5. Fernandes, K. F. Imobilização de Horseradish Peroxidase em Diferentes Polianilinas: Aplicações Analíticas. Tese de Doutorado, Universidade Estadual de Campinas, 2000.

6. Cardoso, C. L.; Moraes, M. C. DE; Cass, Q. B. Imobilização de Enzimas em Suportes Cromatográfi cos: uma Ferramenta na Busca por Substâncias Bioativas, Química Nova, v. 32, n. 1, p. 175-187, 2009.

7. Mendes, A. A.; Oliveira, P. C. DE; Castro, H. F. DE; Giordano, R. L. C. Aplicação de Quitosana como Suporte para a Imobilização de Enzimas de Interesse Industrial, Química Nova, No Prelo.

8. Alfaya, A. A. S.; Kubota, L. T. A Utilização de Materiais Obtidos pelo Processo de Sol-Gel na Construção de Biossensores, Química Nova, v. 25, n. 5, p. 835-841, 2002.

9. Unger, K.K. Porous Silica, Elsevier. Amsterdam – New York, 1979.

10. Iler, R.K. The Chemistry of Silica, Jonh Wiley & Sons, New York, 1979.

11. Scott, R.P.W. & Traiman, S.J. Chromatogr., 196: 193, 1980.

12. Frye, J.S.; Hawkins, B.L. & Maciel, G.E. J. Catal., 98: 444, 1986.

13. Vrancken, K.A.; Possemiers, K.; Voort, P. & Vansant, E.F. Surface modifi cation of silica gels with aminoorganosilanes. J. Colloid Interface Sci. 235-241, 1994.

14. Cestari, A.R. & Airold, C., Thiol-Anchored silica and its oxidized form- Some divalent cations chemsorbed in aqueous and nonaqueous solvents. J. Braz. Chem. Soc., vol.6, n0 3, 291-296, 1995.

15. Vogel, A.I. Química Orgânica, vol. 1, 3a Ed. Livro Técnico S.A. e EDUSP, Rio de Janeiro, 1971.

16. Lowry, O.H.; Rosebrough, N.; Farr, A. & Randall, R. Protein measurement with the Folin phenol reagent. J. Biol. Chem. 193: 265-275, 1951.

17. Airoldi, C. & Alcântara, E.F.C. Silica gel immobilized acetylacetone – some thermodynamic data in non-aqueous solvents, Thermochim Acta, 259: 95-102, 1995.

18. Arica, M.Y. & Hasirci, V. Immobilization of glucose oxidase: A comparison of e entrapment and covalente bonding. J. Chem. Tech. Biochnol. 58: 287-292, 1993.

19. Uhlich, T; Uhlich, M. & Tomaschewski, G. Immobilization of enzyme in photochemically cross-linked polyvinyl alcohol. Enzyme Microb. Technol. 19: 124-131, 1996.

20. Arica, M.Y.; Alaeddinoglu, N.G. & Hasirci, V. Immobilization of glucoamylase onto activated pHEMA/EGDMA microspheres: properties and application to a packed-bed reactor. Enzyme Microb. Technol. 22: 152-155, 1998.

21. Cabral, J.M.S.; Kennedy, J.F. & Novais, J.M. Investigation of the operation stabilities and kinetics of glucoamylase immobilized on alkylamine derivatives of titanium (IV) – activated porous inorganic supports. Enz. Microb. Technol. 4: 343-348, 1982.

22. Ramon, O.; Kupiec-Conhen, R. & Chet, I. Regulation of β-1,3-glucanases by carbon starvation in the mycoparasite Trichoderma harzianum. Mycol. Res. 104 (4): 415-420, 2000.

23. Kazan, D.; Ertan, H. & Erarslan, A. Stabilization of Escherichia coli penicillin G acylase against thermal inactivation by crosslinking with dextran dialdehyde polymers, Appl. Microbiol. Biotechnol., 48: 191-197, 1997.

24. Mohamed, A. & Abdel, N. Immobilization of Paenibacillus macerans NRRL B-3186 cyclodextran glucosytransferase and properties of the immobilized enzyme, Process Biochem. 34: 399-405, 1999.

25. Oh, J.O. & Kim, J.H. Preparation and properties of immobilized amyloglucosidase on nonporous PS/PnanSS microspheres, Enzyme Microb. Technol. 27: 356-361, 2000.
Publicado
2011-07-01
Como Citar
Silva, F. A., Alcântara, E. F. C., & Monteiro, V. N. (2011). Imobilização Covalente na Superfície de Sílica Gel da Enzima β-1,3-Glucanase Produzida por Trichoderma Harzianum. Revista Processos Químicos, 5(10), 34-25. https://doi.org/10.19142/rpq.v5i10.139